Neurociencia

Fecha: 01/01/2022

Resumen:Encephalopsin (OPN3) is part of the opsin family of light-sensitive G-protein coupled receptors. OPN3 was discovered in deep brain regions, specifically the arcuate nucleus and the paraventricular nucleus of the hypothalamus, however there have been limited research in the functionality of OPN3. Oancea lab has discovered that OPN3 functions in a light independent manner and signals through Gai to negatively regulate the melanogenic Gαs-coupled MC1R in human epidermal melanocytes. Neuronal melanocortin receptors (MC3R and MC4R) are found in the arcuate nucleus and paraventricular nucleus of the hypothalamus and play non-redundant roles in mediating energy balance. Both MC3R and MC4R share similar structural identities to MC1R and have been found to couple to Gαs. Additionally, Cone and his colleagues found that MC4R couples to Kir7.1 in hypothalamic neurons independent of G-protein activity. Previous data in our lab has revealed that OPN3 colocalizes and forms a physical complex with MC4R. The goal of this study is to test the hypothesis that OPN3 functions to negatively modulate MC4R-mediated signaling. More specifically, we overexpress OPN3 and MC4R in HEK293 cells together with Kir7.1 and measured the potassium current at diferent potentials. We only observed a significant amount of current in cells coexpressing OPN3 and this effect seems to be occluded by MC4R addition. More experiments are required to fully understand the signaling cascade involved and what is the effect of MC4R agonists.

Fecha: 01/01/2022

Resumen:El objetivo de nuestro trabajo es investigar si un metabolito de la dopamina, el acido homovanilico (HVA), producto de la acción enzimática de la mono aminooxidasa (MAO) y la catecol-o-metiltransferasa (COMT) puede actuar como ligando, más específicamente como agonista inverso, del receptor D5R que posee una alta actividad basal. Nuestro blanco de acción son los canales de calcio voltaje operados CaV3.2. Estos canales son clave para la excitabilidad neuronal y disfunciones de los mismos han sido descriptas para patologías graves como la epilepsia. Nuestro laboratorio ha demostrado una sensibilidad de estos canales de calcio a la actividad constitutiva de D5R.En células en cultivo de la línea HEK293T, la coexpresión de D5R con CaV3.2 produce una disminución de la corriente observada mediante la técnica de patch clamp en célula entera. La incubación de las células con 1uM de HVA durante 44 horas, a razón de repetir el estímulo cada 6 horas, produce una restitución significativa de la corriente en presencia del receptor D5R, (valores de las corrientes, p valor, test estadístico utilizado y número de células, adjuntados en la presentación) Nuestra hipótesis es que el HVA ocluye el efecto de la actividad constitutiva de D5R sobre la corriente CaV3.2 actuando como ligando tipo agonista inverso del receptor. Este efecto del HVA es análogo al de un compuesto categorizado dentro de los antipsicóticos clásicos con probado efecto como agonista inverso de D5R, la clorpromazina. En la presentación de mi trabajo expondré los datos que obtuve hasta el momento y plantearé los experimentos futuros que me permitirán abordar mi hipótesis.